Prevalence and effect of intramammary infection due to coagulase-negative staphylococcal (CNS) species in somatic cell counts in milk from Holstein dairy cows in Boyaca, Colombia / Prevalencia y efecto de la infección intramamaria debida a especies de estafilococos coagulasa negativo (ECN) en el conteo de células somáticas en leche de vacas Holstein en Boyacá, Colombia

ABSTRACT Mastitis is one of the most important illnesses in specialized dairy herds worldwide due to the effects on production and animal health. The types caused by CNS has a special importance in a production where the main pathogens are controlled. The objective of the present work is to determine the prevalence of CNS in a dairy herd in Boyaca and also quantify the effects of every species of CNS in SCC. 40 cows were selected and sampled during 6 months, CMT was performed, and results from 1 to trace were sampled. The routine bacteriological test was also performed for CNS identification, and the isolating of CNS was performed through rpoB gene identification and through the type of strain using the pulse gel electrophoresis procedure. Out of 960 samples, 619 were positive for CNS growth. The most prevalent species were Staphylococcus epidermidis, S. chromogenes, S. sciuri, S. simulaans, S. haemolyticus and S. capitis. The results that were found here are similar to the results observed in different parts of the world, which confirms that they are pathogens that must be constantly evaluated because they can go unnoticed in routine controls, especially in those farms where major pathogens are not a serious problem. The results determined in this study demonstrate that CNS generates a slight increase in somatic cells.

RESUMEN La mastitis es una de las enfermedades más importantes en los rebaños lecheros especializados alrededor de todo el mundo debido a los efectos sobre la producción y la salud animal. Los tipos ocasionados por estafilococos coagualasa negativo (ECN) tienen una importancia especial en una producción en la que los principales patógenos están controlados. El objetivo del presente trabajo es determinar la prevalência del ECN en un hato lechero en Boyacá y cuantificar los efectos de cada especie de ECN en el conteo de células somáticas (CCS). Se seleccionaron 40 vacas y se tomaron muestras durante 6 meses, se realizó california mastitis test (CMT) y se tomaron muestras de los resultados desde 1 hasta donde hubo trazas. También se realizó la prueba bacteriológica de rutina para la identificación del ECN y el aislamiento del ECN se realizó mediante la identificación del gen rpoB y del tipo de cepa, usando el procedimiento de electroforesis en gel de pulso. De 960 muestras, 619 fueron positivas para el crecimiento del ECN. Las especies más prevalentes fueron Staphylococcus epidermidis, S. chromogenes, S. sciuri, S. simulans, S. haemolyticus y S. capitis. Los resultados encontrados aquí son similares a resultados en diferentes partes del mundo, lo que confirma que son patógenos que deben ser evaluados constantemente porque pueden pasar desapercibidos en los controles de rutina, especialmente en aquellas fincas donde los patógenos mayores no son un problema grave. Los resultados determinados en este estudio demuestran que el SNC genera un ligero aumento de células somáticas.

Pathogenesis of Bovine alphaherpesvirus 2 in calves following different routes of inoculation / Patogênese do alfaherpesvírus bovino 2 em bezerros inoculados por diferentes vias

Bovine alphaherpesvirus 2 (BoHV-2) is the agent of herpetic mammilitis (BHM), a cutaneous and self-limiting disease affecting the udder and teats of cows. The pathogenesis of BoHV-2 is pourly understood, hampering the development of therapeutic drugs, vaccines and other control measures. This study investigated the pathogenesis of BoHV-2 in calves after inoculation through different routes. Three- to four-months seronegative calves were inoculated with BoHV-2 (107TCID50.mL-1) intramuscular (IM, n=4), intravenous (IV, n=4) or transdermal (TD) after mild scarification (n=4) and submitted to virological, clinical and serological monitoring. Calves inoculated by the IV route presented as light increase in body temperature between days 6 to 9 post-inoculation (pi). Virus inoculation by the TD route resulted in mild inflammatory lesions at the sites of inoculation, characterized by hyperemia, small vesicles, mild exudation and scab formation, between days 2 and 8pi. Virus or viral DNA was detected by PCR in the crusts/swabs collected from lesions of 3 out of 4 animals inoculated TD from day 2 to 8pi. Viremia was detected in 3/4 animals of the IM group (from day 4 to 8pi); in 2/4 animals of the IV group (days 6 and 8pi) but not in the TD group. Calves from all inoculated groups seroconverted to BoHV-2 in titers from 4 to 64, as indicated by virus-neutralizing (VN) assays performed in sera collected at day 15pi. Administration of dexamethasone (Dex) to the inoculated calves at day 48pi, did not result in virus reactivation as indicated by lack of virus detection in the blood and/or in inoculation sites and no increase in VN antibody titers. These results demonstrated that BoHV-2 was able to replicate efficiently in calves following different routes of exposure, produced viremia after IM and IV inoculation and was not reactivated by Dex treatment.(AU)

O alfaherpesvírus bovino 2 (BoHV-2) é um agente etiológico da mamilite herpética (BHM), uma doença cutânea e autolimitante do úbere e tetos de vacas. Pouco se sabe sobre a patogênese do BoHV-2, dificultando o desenvolvimento de medicamentos terapêuticos e vacinas. Este estudo investigou a patogênese do BoHV-2 em bezerros após a inoculação por diferentes vias. Bezerros soronegativos de três a quatro meses foram inoculados com BoHV-2 (107TCID50.mL-1) por via intramuscular (IM, n=4), por via intravenosa (IV, n=4) ou transdérmica (TD, n=4) após escarificação leve e submetidos a monitoramento virológico, clínico e sorológico. Os bezerros inoculados pela via IV apresentaram aumento leve da temperatura corporal entre os dias 6 a 9 pós-inoculação (pi). A inoculação do vírus pela via TD resultou em lesões inflamatórias leves nos locais de inoculação, caracterizadas por hiperemia, pequenas vesículas, exsudação leve e formação de crostas, entre os dias 2 e 8pi. O vírus ou DNA viral foi detectado por PCR nas crostas/swabs coletados de lesões de 3 de 4 animais inoculados TD do dia 2 ao 8pi. Viremia foi detectada em 3/4 dos animais do grupo IM (do dia 4 ao 8pi); em 2/4 animais do grupo IV (dias 6 e 8pi), mas não no grupo TD. Bezerros de todos os grupos inoculados soroconverteram o BoHV-2 em títulos de 4 a 64, conforme indicado por ensaios de vírus-neutralização (VN) realizados em soro coletado no dia 15pi. Administração de dexametasona (Dex) nos bezerros inoculados no dia 48pi, não resultou em reativação do vírus, como indicado pela falta de detecção de vírus no sangue e/ou nos locais de inoculação e pela ausência de aumento nos títulos de anticorpos. Estes resultados demonstraram que o BoHV-2 foi capaz de replicar eficientemente em bezerros seguindo diferentes vias de inoculação, produziu viremia após a inoculação IM e IV e não foi reativado pelo tratamento com Dex.(AU)

Effect of the type of milking on mammary gland examination in Saanen goats / Efeito do tipo de ordenha sobre o exame da glândula mamária de cabras Saanen

This research evaluated the effect of milking on the physical exam of the mammary gland (MG) and milk examination in Saanen goats. Six properties were selected, four farms were used after evaluation of criteria selection and distributed in two groups according to the milking method: manual or mechanical. The physical examination of MG was performed using the techniques of inspection and palpation, in addition to the examination of the milk by strip cup, California Mastitis Test, somatic cell count, and bacteriological exam. It was possible to detect an association between the milking method with the most of physical exam of the MG: inspection of the MG (p = 0.001), inspection of the teat (p = 0.002), palpation of the MG (p = 0.054) and palpation of the teat (p = 0.036). The machine milking had an association with the reduction of the volume of MG (OR = 6.00), reduction of the teat size (OR = 16.19), and firm consistency of mammary parenchyma (OR = 2.39). The use of machine milking represented a less risk for an increase of the volume of the MG volume (OR = 0.288) and the presence of cisternitis (OR = 0.490). The association between the SCC and the type of milking was also detected (p = 0.002). Machine milking was associated with changesin the physical exam of MG and milk examination compatible with traumatic lesions. This information indicates inappropriate use of milking equipment in the dairy goat's properties.(AU)

Esta pesquisa avaliou o efeito da ordenha sobre o exame físico da glândula mamária (GM) e do leite em cabras Saanen. Seis propriedades foram selecionadas, quatro fazendas foram utilizadas após avaliação da seleção dos critérios e distribuídas em dois grupos de acordo com o método de ordenha: manual ou mecânico. O exame físico da GM foi realizado utilizando as técnicas de inspeção e palpação, além do exame do leite pelo teste da caneca de fundo escuro, California Mastitis Test, contagem de células somáticas e exame bacteriológico. Foi possível detectar uma associação entre o método de ordenha com a maioria dos exames físicos da GM: inspeção da GM (p = 0,001), inspeção do teto (p = 0,002), palpação da GM (p = 0,054) e palpação do teto (p = 0,036). A ordenha mecânica associou-se com a redução do volume de GM (OR = 6,00), redução do tamanho do teto (OR = 16,19) e consistência firme do parênquima mamário (OR = 2,39). O uso da ordenha mecânica representou menor risco para o aumento do volume do volume da GM (OR = 0,288) e presença da cisternite (OR = 0,490). Também foi detectada a associação entre a CCS e o tipo de ordenha (p = 0,002). A ordenha mecânica foi associada com as alterações no exame físico de GM e do leite compatíveis com lesões traumáticas. Essas informações indicam o uso inadequado do equipamento de ordenha na criação de cabras leiteiras.(AU)

Composition of milk and mammary gland health in Criollo breed mares during lactation / Composição de leite e saúde de glândulas mamárias em éguas da raça Crioula durante lactação

The aim of this study was to evaluate the components of milk and mammary gland health of Criollo mares. A total of 12 mares coming from a farm in southern Brazil were used. Samples of milk were taken from each mare every two weeks up to 180 days of lactation. The characteristics analyzed were fat, protein, lactose, total solids, somatic cell count (SCC) and total bacterial count (TBC). In relation to the health of the udder and the milk of the mares, the SCC was 24.1 x 103cells / ml and TBC was 44 x 103CFU / ml, while the average of milk components was 0.57% fat, 1.95% protein, 6.71% lactose and 9.24% total solids. Stage of lactation and individual characteristics may influence the level of milk components. The low SCC and TBC found in the Criollo breed mares' milk ensure the quality of their milk compared to other species.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar os componentes do leite e a saúde das glândulas mamárias de éguas da raça Crioula. Foi utilizado um total de 12 éguas, localizadas em uma fazenda no sul do Brasil. Foram retiradas amostras de leite de cada égua quinzenalmente até 180 dias de lactação. As características analisadas foram gordura, proteína, lactose, sólidos totais, contagem de células somáticas (CCS) e contagem bacteriana total (CBT). Em relação à saúde do úbere e ao leite das éguas, a CCS foi 24,1 x 10 3 células/mL e a CBT foi 44 x 10 3 UFC/mL, enquanto a média dos componentes do leite foi 0,57% de gordura, 1,95% de proteína, 6,71% de lactose e 9,24% de sólidos totais. O estágio da lactação e as características individuais podem influenciar o nível de componentes do leite. As baixas taxas de CCS e CBT encontradas no leite de éguas da raça Crioula asseguram a qualidade desse leite comparado ao de outras espécies.(AU)

Polymorphism of bovine lipocalin-2 gene and its impact on milk production traits and mastitis in Holstein Friesian cattle

Background: Mastitis is one of the most serious diseases of dairy cattle, causing substantial financial losses. While predisposition to reduced somatic cell count in milk has been considered for in cattle breeding programs as the key indicator of udder health status, scientists are seeking genetic markers of innate immune response, which could be helpful in selecting cows with improved immunity to mastitis. Lipocalin-2 (LCN2) is a protein involved in the response of the immune system by eliminating iron ions which are necessary for the growth of pathogenic bacteria, so LCN2 may be considered as a natural bacteriostatic agent and could become a marker of infection. Results: A total of five SNPs were identified in LCN2 gene (one in the promoter, three in exon 1, and one in intron 1). A single haplotype block was identified. The locus g.98793763GNC was found to have a significant impact on protein levels in milk, and alleles of this locus were identified to have a significant positive dominance effect on this trait. None of the four analysed loci had a statistically significant impact on the milk yield, fat levels in milk or the somatic cell score. LCN-2 gene had no significant impact on the incidence of mastitis in the cows. Conclusions: Although the identified SNPs were not found to have any impact on the somatic cell count or the incidence of mastitis in cows, it seems that further research is necessary, covering a larger population of cattle, to confirm the association between lipocalin-2 and milk production traits and mastitis.

Histopathological and microbiological findings in buffalo chronic mastitis: evidence of tertiary lymphoid structures

Buffalo mastitis is an important economic problem in southern Italy, causing qualitative/quantitative alterations in milk and resulting in economic losses due to the sub-clinical course and chronic evolution. We investigated 50 udders of slaughtered buffaloes and subjected them to effectual microbiological screening to evaluate macro and microscopic mammary gland changes, immune-characterize the cell infiltrates, and compare the degree of tissue inflammation with somatic cell counts. Numerous Gram-positive and Gram-negative bacteria were isolated from all samples, majority of which were environmental mastitis pathogens. Histological features referable to chronic mastitis were observed in 92% udders. Lymphocytes, plasma cells and macrophages were found to evolve into aggregates in 48% udders, which often organized to form tertiary lymphoid structures (TLSs). A predominance of interstitial CD8+ over CD4+ lymphocytes and, in TLSs, scattered CD8+ lymphocytes in the mantle cells and CD79+ lymphocytes in germinal centers, were evidenced. Environmental pathogens are known to persist and cause chronic inflammatory changes in buffaloes, where CD8+ lymphocytes play an important role by controlling the local immune response. Moreover, the TLSs evidenced here for the first time in buffalo mastitis, could play a role in maintaining immune responses against persistent antigens, thereby contributing in determining the chronic course of mastitis.

Understanding mammary activity in red-rumped agouti and implications for management and conservation of this Neotropical game species / Compreendendo a atividade mamária na cutia e as implicações para o manejo e a conservação desta espécie cinegética Neotropical

Abstract The red-rumped agouti (Dasyprocta leporina) produces precocial young and is the most hunted and farmed game species in several Neotropical countries. An understanding of the reproductive biology, including the relationship between litter size and teat functionality is crucial for conservation management of this animal. In precocial mammals, as the red-rumped agouti, maintaining maternal contact to learn foraging patterns may be more important than the energy demands and nutritional constraints during lactation and suckling may not play important roles when compared to altricial mammals. Therefore, in this study we evaluated the relationship between mammary functionality with litter size, litter birth weight, and parturition number in captive red-rumped agouti. Functionality was assessed by manual palpation of teats from un-sedated females (N=43). We compared the average birth weight of all newborns, male newborns and female newborns among agoutis with different litter sizes and different parturitions by one way ANOVA's, while Pearson's Chi-squared tests were used to detect relationships between teat functionality, litter size, and parturition number. Parturition number had no effect on the mean birth weight of all young (F0.822, P > 0.05), male young (F0.80, P > 0.05) or female young (F0.66, P > 0.05) in the litters. We found (i) no significant correlations (P > 0.05) between teat functionality and litter size and (ii) no significant correlations (P > 0.05) between teat functionality and parturition number. This suggests that whilst all teat pairs were functional, functionality was a poor indicator of litter size; suggesting that female agouti young may not have a high dependency on maternal nutrition; an possible evolutionary strategy resulting in large wild populations; hence its popularity as a game species.

Resumo A cutia (Dasyprocta leporina) produz filhotes precoces, e é a espécie cinegética mais caçada e criada em muitos países neotropicais. O entendimento da biologia reprodutiva, incluindo a relação entre o tamanho da ninhada e a funcionalidade das glândulas mamárias é crucial para o manejo conservacionista deste animal. Nos mamíferos precoces, como a cutia, manter o contato materno para a aprendizagem de padrões de forrageamento pode ser mais importante do que a demanda energética e de restrição nutricional durante a lactação, e a amamentação pode não desempenhar um papel importante quando comparado aos mamíferos altriciais. Portanto, neste estudo nós avaliamos a relação entre a funcionalidade mamária com o tamanho da ninhada, peso ao nascer da ninhada, e o número de partos em cutias cativas. A funcionalidade foi avaliada por meio de palpação manual das glândulas mamárias em fêmeas não sedadas (N=43). Nós comparamos a média do peso ao nascer de todos os recém-nascidos, macho e fêmeas recém-nascidos entre cutias com diferentes tamanhos de ninhadas e diferentes parturições, por meio da análise one-way ANOVA unifatorial; enquanto o teste do chi-quadrado de Pearson foi utilizado para detectar as relações entre a funcionalidade da glândula mamária, o tamanho da ninhada e o número de partos. O número de partos teve efeito na média de peso ao nascer dos filhotes (F0,822, P > 0,05), filhotes machos (F0,80, P > 0,05) ou filhotes fêmeas (F0,66, P > 0,05) nas ninhadas. A análise bivariada de Pearson (i) não mostrou correlação (P > 0,05) entre a funcionalidade da glândula mamária e o tamanho da ninhada e (ii) nenhuma correlação significativa (P > 0,05) entre a funcionalidade da glândula mamária e o número de parições. Os resultados sugerem que, embora todos os pares de tetas fossem funcionais, as cutias recém-nascidas podem não depender da nutrição materna para sobreviver; .embora todos os pares de tetas sejam funcionais, as cutias recém nascidas aparentemente não dependem da nutrição materna para sua sobrevivência; esta é, provavelmente, uma estratégia evolutiva que resulta em grandes populações da cutia em vida livre; e que pode explicar sua popularidade como espécie cinegética

Implications of bovine viral diseases for udder health / As implicações das doenças virais para a saúde da glândula mamária bovina

Several factors can affect bovine mammary gland health and although bacterial mastitis is the most studied and reported cause, viral infections may also have negative effects on bovine udder health. Viral infections can indirectly damage the papillary duct of the teat, and induce or exacerbate signs of bovine mastitis due to viral-induced immunosuppressive effects that may lead to a greater susceptibility to bacterial mastitis and even intensify the severity of established bacterial infections. Some viruses (Bovine alphaherpesvirus2, cowpox, pseudocowpox, foot-and-mouth disease, vesicular stomatitis and papillomavirus) affect the integrity of the udder skin, leading to teat lesions, favoring the entry of mastitis-causing pathogens. It is therefore possible that the association between mastitis and viruses is underestimated and may, for example, be associated with negative bacterial culture results. Few milk samples are tested for the presence of viruses, mainly because of the more laborious and expensive procedures required. Furthermore, samples for virus testing would require specific procedures in terms of collection, handling and storage. Thus, there is a knowledge gap in regard to the actual impact of viruses on bovine udder health. Despite the fact that serum anti-virus antibodies can be detected, there is not enough evidence to confirm or exclude the effect of viruses on udder health. However, any expectation of milk production from healthy animals should consider the possible impact of viral infections in mastitis development and not underestimate the importance of actions to diagnose and control the disease. Therefore, the purpose of this review is to describe the association of diagnosis and control of viral diseases and their effect on bovine udder health.(AU)

Diversos fatores podem afetar a saúde da glândula mamária bovina e embora a mastite bacteriana seja a causa mais estudada e relatada, as infecções virais também podem ter efeitos negativos sobre a saúde da glândula mamária bovina. De forma indireta as infecções virais podem danificar o ducto papilar do teto ou ainda, induzir ou agravar a mastite bovina, devido aos seus efeitos imunossupressores que podem levar a uma maior susceptibilidade para casos de mastite bacteriana e até mesmo intensificar a severidade das infecções bacterianas já estabelecidas. Alguns vírus (Alphaherpesvirus bovino 2, cowpox, pseudocowpox, febre aftosa, estomatite vesicular e papilomavírus) afetam a integridade da pele do úbere, levando a lesões no teto, favorecendo a entrada de patógenos causadores de mastite. Portanto é possível que a associação entre mastites e viroses seja subestimada e podem, por exemplo, estar associada às amostras de diagnóstico de mastite bacteriana com resultados de cultura bacteriana negativa. Além disso, as amostras de leite de vacas com mastite não são coletadas, tratadas e armazenadas adequadamente para pesquisa de vírus que requer cuidados específicos, além de um diagnóstico mais trabalhoso e caro. Desse modo, há lacunas a serem preenchidas quanto ao real impacto das viroses sobre a saúde da glândula mamária bovina. Apesar da possibilidade de detecção de anticorpos séricos contra os vírus, não existem evidências suficientes para incluir ou excluir os efeitos das viroses a saúde da glândula mamária bovina. Porém, a expectativa de produção de leite por meio de animais saudáveis deve considerar os possíveis impactos das infecções virais no desenvolvimento de mastites, não se pode, portanto, subestimar a importância de ações para o diagnóstico e controle das mesmas. Sendo assim, o propósito desta revisão é descrever as relações entre o diagnóstico de controle das doenças virais e seus potenciais impactos sobre a saúde da glândula mamária bovina.(AU)

Avaliação das condições físicas e sanitárias das fazendas de produção de leite caprino na área rural da região metropolitana de Natal, RN / Evaluation of the physical and sanitary conditions of goat milk farms in the rural area of the metropolitan region of Natal, RN

[{"text": "A caprinocultura leiteira no Nordeste é uma atividade que tem grande\r\ncontribuição para a agricultura familiar. Diante desse cenário esta pesquisa\r\nobjetivou realizar uma avaliação das fazendas de leite caprino na área rural\r\nda região metropolitana de Natal-RN, visando verificar as condições do setor,\r\npropondo apoio para uma melhor qualidade do leite. Inicialmente foram\r\nrealizadas reuniões com os produtores para esclarecimento sobre o projeto\r\ne adesão voluntária dos mesmos. O trabalho teve a aplicação de um questionário\r\nsocioeconômico, abordando variáveis relativas à propriedade e de um\r\nchecklist para verificação do processo de ordenha do leite caprino.Das 14\r\npropriedades visitadas, 36% tem de 5 a 10 anos de atividade, metade dos proprietários\r\npossui ensino superior completo e 72% deles utilizam apenas mão\r\nde obra contratada. Em relação à ordenha, 15% não higienizam os tetos dos\r\nanimais antes da mesma, 86% não realizam o pré-dipping e nenhum deles\r\ntem os funcionários capacitados. Observou-se que ações simples e de baixo\r\ncusto como a lavagem dos tetos dos\r\nanimais e a higiene correta do local\r\nde ordenha e dos ordenhadores são\r\nfatores que precisam ser trabalhados\r\ncom os produtores para melhorar a\r\nqualidade do leite produzido. Durante\r\nas visitas algumas orientações\r\nforam dadas aos produtores e posteriormente\r\nforam entregues relatórios\r\ncom sugestões de melhorias\r\nnas propriedades. A pesquisa conclui\r\nque os produtores de leite caprino na\r\nárea rural da região metropolitana\r\nde Natal-RN necessitam de melhorias\r\nem suas fazendas leiteiras e que\r\nprecisam de apoio e orientações de\r\ndiferentes instituições para ampliar\r\nconhecimentos e aumentar a qualidade\r\ndo leite caprino.(AU)", "_i": "pt"}]

Caracterização clínica e histopatológica de tumores mamários em cadelas atendidas em Viçosa, MG / Clinical and histopathological characterization of breast tumors in female dogs taken care of in Viçosa, MG

Introdução: a neoplasia da glândula mamária é o tumor mais comum em cadelas. Devido a sua elevada frequência, torna-se necessário investigar os aspectos anátomo-patológicos dessas neoplasias de modo a promover o aumento da longevidade e melhorias na qualidade de vida destes animais. Objetivo: analisar as características clínicas e histopatológicas de tumores mamários em cadelas atendidas em Viçosa, MG. Métodos: trata-se de um estudo descritivo, exploratório, observacional, com abordagem quantitativa, realizada em um laboratório de histopatologia e histologia com 12 cadelas que apresentam tumor mamário. As amostras analisadas foram coletadas no Hospital Veterinário da cidade de Viçosa, MG. Após a fixação, o material foi avaliado macroscopicamente e, em seguida, submetido ao processamento histológico. As preparações histológicas foram analisadas por microscopia óptica. Resultados: no estudo, verificaram-se 58,3% de neoplasias malignas e 33,3% de neoplasias benignas. A maior parte dos tumores da glândula mamária canina foi de comportamento maligno, e o tipo histológico correspondente mais prevalente foi o carcinoma (91,6%). Conclusão: os tipos histológicos malignos de maior ocorrência nas cadelas correspondem ao carcinoma. O seu diagnóstico e terapêutica precoces são importantes na prevenção do desenvolvimento neoplásico nestas cadelas. (AU)

Introduction: mammary gland neoplasm is the most common tumor in bitches. Due to its high frequency, it is necessary to investigate the anatomopathological aspects of these neoplasias in order to promote the increase of longevity and improvements in the quality of life of these animals. Objective: to analyze the clinical and histopathological characteristics of breast tumors in female dogs taken care of in Viçosa, MG. Method: this is a descriptive, exploratory, observational study with a quantitative approach, carried out in a laboratory of histopathology and histology with 12 female dogs presenting breast tumor. The analyzed samples were collected at the Veterinary Hospital from city of Viçosa, MG. After fixation, the material was macroscopically evaluated and then subjected to histological processing. Histological preparations were analyzed by optic microscopy. Results: in the study, 58.3% of malignant neoplasias were observed, accompanied by 33.3% of benign neoplasy. Most tumors of the canine mammary gland were malignant and the most common histological prevalent was carcinoma (91.6%). Conclusion: the most frequent malignant histological types in dogs correspond to carcinoma. Its early diagnosis and therapy is important in preventing neoplasm development in these bitches. (AU)

Avaliação termográfica do desenvolvimento mamário de búfalas e sua regulação endócrina em distintos estágios fisiológicos / Thermographic evaluation of the mammary development of buffaloes and their endocrine regulation in different physiological stages

O conhecimento do desenvolvimento mamário de um rebanho leiteiro é fundamental, pois relaciona-se à eficiência produtiva. Objetivou-se avaliar a associação dos parâmetros térmicos mamários com concentrações hormonais de búfalas em distintos estágios fisiológicos. Foram utilizadas 24 búfalas mestiças Murrah, em quatro grupos (n= 6): grupo 1 (bezerras), grupo 2 (novilhas), grupo 3 (gestantes) e grupo 4 (lactantes). A cada 28 dias, durante 4 meses, realizaram-se exames de termografia digital por infravermelho para verificar temperatura superficial dos corpos mamários craniais (CMCr) e caudais (CMC), das cisternas craniais (CGMCr) e caudais (CGMC) e tetas craniais (TGMCr) e caudais (TGMC). Foi aferida temperatura retal (TR) e colhido sangue para mensuração das concentrações plasmáticas do fator semelhante a insulina tipo-I, insulina (INS), hormônio do crescimento (GH), progesterona (P4) e estradiol. Grupos 1 e 2 apresentaram correlação de TR com CGMCr. No grupo 3, TR correlacionou-se com TGMCr, TGMC e concentrações plasmáticas de P4. No grupo 4, houve correlação de TR com CGMC, TGMCr e concentrações plasmáticas de INS e GH, e de TGMC com concentrações plasmáticas de GH. Nos quatro grupos, CGMCr correlacionou-se com CMCr e TGMCr, semelhantemente ao observado na porção caudal. Variações térmicas mamárias refletiram alterações fisiológicas aguardadas nos períodos avaliados.(AU)

The knowledge of the mammary development of a dairy herd is key, since it is related to its productive efficiency. The objective of this study was to evaluate the association of mammary thermal parameters with hormonal concentrations of buffaloes at different physiological stages. Twenty-four Murrah crossbred buffaloes were used in four groups (n= 6): group 1 (calves), group 2 (heifers), group 3 (pregnant animals) and group 4 (lactating animals). Every 28 days, for 4 months, infrared digital thermography was performed to check the surface temperature of cranial (CrCM) and caudal (CCM) corpus mammae, cranial (CrC) and caudal (CC) cisterns and cranial (CrT) and caudal teats (CT). Rectal temperature (RT) was measured and blood was collected to measure plasma concentrations of insulin-like factor I, insulin (INS), growth hormone (GH), progesterone (P4) and estradiol. Groups 1 and 2 presented correlation of RT with CrC. In group 3, RT correlated with CrT, CT and plasma P4 concentrations. In group 4, there was correlation of RT with CC, CrT and plasma concentrations of INS and GH, and CT with plasma GH concentrations. In all four groups, CrC correlated with CrCM and CrT, similar to that observed in the caudal portion. The thermal changes in the mammary glands reflected the expected physiological changes in the evaluated periods.(AU)

Influência da profundidade do úbere na limpeza dos tetos e na saúde da glândula mamária em ordenha robótica / Influence of udder depth on cleaning teats and health of the mammary gland in robotic milking

O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência da profundidade do úbere sobre a limpeza de tetos e a saúde da glândula mamária. O experimento foi desenvolvido no período de março a junho de 2014, em Castro, PR. Foram utilizadas 20 vacas da raça Holandesa confinadas em free stall e ordenhadas em sistema de ordenha robotizada (SOR). As vacas foram divididas em quatro grupos com cinco animais cada (duas primíparas e três multíparas), com base na distância do piso do úbere em relação ao jarrete (úbere profundo, normal, pequeno e raso). Os dados, registrados eletronicamente, foram coletados mensalmente, por quatro meses, referentes à semana do controle leiteiro oficial. Para avaliar a efetividade da limpeza dos tetos, foram feitos swabs de dois tetos contralaterais (anterior direito e posterior esquerdo) antes e após a limpeza automática, bem como foram esfregadas toalhas umedecidas, uma vez, ao redor dos outros tetos. Uma amostra de leite foi coletada por vaca para determinar a contagem de células somáticas (CCS). Na análise multivariada, foi observada relação da profundidade do úbere com a limpeza de tetos avaliada por meio do escore de limpeza de tetos com toalhas umedecidas (ELTT). Os úberes levemente acima do jarrete (normal) apresentaram menor CCS e contagem bacteriana total (CBT) dos tetos. Os úberes rasos apresentaram maior diferença no ELTT. As vacas com úberes profundo e raso apresentaram menor efetividade na limpeza de tetos e na saúde da glândula mamária. Vacas com úbere normal apresentaram conformação e sanidade da glândula mamária e contaminação de tetos mais adequadas à ordenha robótica. Em fazendas que pretendem introduzir o SOR, é recomendado selecionar vacas com úbere com profundidade um pouco acima do jarrete. O impacto do SOR na CBT dos tetos está relacionado à condição de limpeza deles na pré-ordenha e das instalações. Portanto, a condição de ambiência das vacas é fundamental para a saúde da glândula mamária e a obtenção de um leite com alta qualidade.(AU)

The aim of this study was to assess the influence of the depth of the udder on cleaning of teats and health of the mammary gland. The experiment was developed in the period spanning from March to June 2014, in Castro, PR. Twenty Holstein cows confined in free stall and milked in an automatic milking system (AMS) were used. The cows were divided into 4 groups with five animals (2 primiparous and 3 multiparous) based on the depth of the udder (udder depth: normal, small, and shallow). The electronically recorded data were collected monthly for four months, referring to the week of the official production milk control. To evaluate the effectiveness of cleaning teats, two contralateral teats were swabbed (right front quarter and left rear) before and after the automatic cleaning and once moistened towels were scrubbed around the other teats. A sample of milk was collected per cow to determine the somatic cell count (SCC). In the multivariate analysis relation of the udder depth with the teat cleaning was observed and evaluated through the teat cleaning with moistened towels score (TCTS). Udders slightly above the hocks (normal) had lower SCC and total bacterial count (TBC) of the teats. Shallow udders showed greater difference in TCTS. Cows with deep and shallow udders show less effective teat cleaning and health of the mammary gland. Cows with normal udders presented mammary gland conformation and health and contamination of teats most appropriate for robotic milking. On farms intending to introduce AMS it is recommended to select cows with udder depth which is a little above the hock. The impact of AMS on the TBC of the teats is related to the condition of cleaning of the teats pre-milking and housing conditions. Therefore, the condition of ambience of the cows is fundamental for the health of the mammary gland and obtaining high quality milk.(AU)

Atividade antimicrobiana in vitro do extrato etanólico bruto da folha da Hymenaea martiana Hayne frente às Staphylococcus spp. e avaliação de seu potencial como desinfetante em cabras / In vitro antimicrobial activity of ethanolic extract of Hymenaea martiana Hayne leaf on strains of Staphylococcus spp. and evaluation of its potential as a disinfectant in goats

Este estudo objetivou avaliar a ação antimicrobiana e antisséptica do extrato etanólico bruto da folha da Hymenaea martiana (Jatobá). O estudo foi realizado no Laboratório de Microbiologia e Imunologia da UNIVASF, na cidade de Petrolina-PE. Os extratos foram preparados utilizando diferentes diluentes, sendo estes: álcool etílico absoluto e a água destilada. Em seguida, foi empregada a técnica da Concentração Inibitória Mínima (MIC) e da Concentração Bactericida Mínima (CBM). Todos os ensaios foram realizados em triplicata. A CBM média do extrato diluído em etanol foi de 358µg/µL e do extrato diluído em água destilada foi igual a 520,82µg/mL. Não houve diferença (P<0,05) quanto à inibição bacteriana para o extrato diluído em álcool etílico absoluto ou água destilada autoclavada. Ao comparar a atividade do extrato diluído em álcool etílico absoluto e a relação com a presença do gene blaZ, observou-se que os isolados negativos para o gene pesquisado apresentaram uma CBM igual a 412,3µg/mL, e, quando comparadas aos que foram positivos para o gene blaZ, que foi de 308,80µg/mL, contudo sem diferença estatística. Quanto à inibição das bactérias utilizando extrato aquoso, a atividade foi igual para as bactérias com ou sem o gene (520,82µg/mL). Desse modo, tanto o extrato diluído em álcool etílico absoluto quanto em agua destilada autoclavada demonstrou atividade antimicrobiana, sugerindo que ocorreu extração de substâncias bioativas. Em relação ao potencial antisséptico, H. martiana teve ação pareada com o cloro, contudo aquele agiu mais rapidamente, enquanto o cloro agiu de modo ideal uma hora após a aplicação; ambos os resultados destacam que o extrato etanólico bruto das folhas de H. martiana possui potencial de combate à proliferação de bactérias ambientais e infecciosas, surgindo como uma forma de prevenir a mastite.(AU)

This study aimed to evaluate the antimicrobial and antiseptic action of the crude ethanolic extract of Hymenaea martiana leaves. The study was conducted at the Laboratory of Microbiology and Immunology of UNIVASF, city of Petrolina, state o Pernambuco. The extracts were prepared using different solvents, such as absolute ethyl alcohol and distilled water. Then, Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) techniques were used. All assays were performed in triplicate. The average of MBC extract diluted in ethanol was 358µg/mL, and the extract diluted in distilled water was equal to 520.82µg/mL. There was no difference (P<0.05) and bacterial inhibition to extract diluted in absolute ethanol or autoclaved distilled water. Comparing the activity of the extract diluted in ethanol and the relation with the presence of blaZ gene, it was observed that the negative strains for there searched gene showed a MBC equal to 412.3µg/mL in relation to those that were positive for blaZ gene, that was 308.80µg/µL, and, however, there was no statistical difference. The bacterial inhibition activity using an aqueous extract was equal for the bacteria that had or not the blaZ gene (520.82µg/mL). Thus, the extract diluted in absolute ethanol in autoclaved distilled water as demonstrated antimicrobial activity, suggesting that occurred extraction of bioactive substances. Regarding the antiseptic potential, H. martiana had the same action of chlorine, although, this acted immediately, while the chlorine action happened properly an hour after the application. Both results pointed out that the crude ethanolic extract of H. martiana leaves has potential to combat the proliferation of environmental and infectious bacteria, emerging as a way to prevent mastitis.(AU)

Ultrasonography and theloscopy for the diagnosis of obstructive fibrosis in the Fürstenberg venous ring in the four quarters of the udder of a cow: a case report / Ultrassonografia e teloscopia no diagnóstico de fibrose obstrutiva do anel venoso de Fürstenberg em quatro quartos mamários em bovino: relato de caso

We report an unusual case of obstructive fibrosis of the venous ring of Fürstenberg in all four quarters of the udder of a cow of the Girolando breed (3/8 Gir and 5/8 Dutch). The information was obtained through a review of medical records, anamnesis, and imaging methods such as theloscopy and ultrasonography. Histopathological analysis provided a definitive diagnosis.(AU)

Relata-se a ocorrência de um caso incomum de fibrose obstrutiva do anel venoso de Fürstenberg em quatro quartos mamários de uma vaca da raça Girolando (3/8 Gir e 5/8 Holandês). As informações foram obtidas por meio de revisão do prontuário, da anamnese e de métodos de diagnóstico por imagem, como a teloscopia e a ultrassonografia. A análise histopatológica forneceu o diagnóstico definitivo.(AU)

Mammary gland morphology in the northern Amazon red squirrel (Sciurus igniventris) / Morfologia da glândula mamária em esquilo do Norte Amazônico (Sciurus igniventris)

Sciurus igniventris is a squirrel with broad distribution in South America. We examined one female adult specimen which was donated after death by trampling. The aim of this work was describe the morphological characteristics of mammary gland of one specimen. The body was fixed using 10% aqueous formaldehyde. Tissues were processed and slides prepared following standard histological protocols. Morphological analysis of the mammary glands revealed similarities to those described in the literature for domestic and wild mammals. As special features in kind, macroscopically identified a pair of thoracic glands, followed by three pairs of abdominal glands. Microscopically the abundant presence of connective tissue dividing the alveolar-tubular glands. Similar to that described for domestic and wild mammals.

Sciurus igniventris é um esquilo com distribuição na América do Sul. Nós examinamos uma fêmea adulta que foi doada após morte por atropelamento. O objetivo do trabalho foi descrever as características morfológicas da glândula mamária de um exemplar da espécie. O animal foi fixado utilizando solução aquosa de formoldeído a 10%. Os tecidos foram processados e lâminas foram preparadas seguindo protocolos histológicos padrões. A análise morfológica da glândula mamária revelou similaridades com o que temos descrito na literatura para animais domésticos e selvagens. Como particularidades na espécie, macroscopicamente foi identificado um par de glândulas torácicas, seguidas por três pares de glândulas abdominais. Microscopicamente ocorreu a presença abundante de tecido conectivo dividindo as glândulas túbuloalveolares. Semelhante ao descrito para mamíferos domésticos e selvagens.

Estimativa das perdas de produção leiteira em vacas mestiças Holandês x Zebu com mastite subclínica baseada em duas metodologias de análise / Comparison of two methodologies to estimate losses of milk production in crossbred Holstein x Zebu cows with sub-clinical mastitis

Contagem de células somáticas (CCS) e produção de leite de vacas mestiças Holandês x Gir foram utilizadas para avaliação da perda de produção de leite estimada por duas metodologias, baseadas na CCS média da lactação total encerrada ou na CCS e nas pesagens de leite em diferentes estágios de lactação. Nas primíparas consideradas com mastite subclínica (CCS ≥ 200.000 células mL-1), a perda de produção na lactação total, avaliada pela CCS média da lactação, foi de 814kg. Para as multíparas, não houve diferença na produção de leite entre vacas com e sem MSC com base na CCS média da lactação. A estimativa avaliada por meio de testes mensais de CCS e pesagens de leite em diferentes estágios de lactação, balanceada pela prevalência de mastite subclínica do mês foi de 917,9kg para primíparas e 1178,9kg para multíparas. A contraposição da produção de leite com a CCS em diferentes estágios da lactação evidenciou maior perda de produção em relação à observação da CCS média da lactação. A perda de produção de leite de vacas baseada na CCS média de toda a lactação foi subestimada quando comparada à contraposição da produção de leite com CCS em diferentes estágios da lactação.(AU)

Somatic cell count (SCC) and milk production of crossbred Holstein x Gir were used to evaluate the estimated loss of milk production two methodologies, based on the average SCC of total closed lactation, or average SCC and weighing milk at different stages of lactation. In primiparous with SCC mL ≥200,000 cells-1 production loss in the total lactation, evaluated by the average lactation SCC, was 814 kilograms. For multiparous, there was no difference in milk production between cows with and without SCM based on the SCC media of lactation. The estimate of lost production assessed through monthly testing of SCC and milk weighing at different stages of lactation, balanced by the prevalence of subclinical mastitis, was 917.9kg for primiparous and 1178.9kg for multiparous. The estimative of milk production with CCS at different stages of lactation showed greater loss of milk production when compared to the estimative based on the average SCC throughout the period of lactation. The milk production loss method based on the average somatic cell count of the whole lactation was underestimated when compared to the method based on average SCC in different stages of lactation.(AU)

Mammary artery Doppler ultrasonography of Brazilian Bergamasca dairy ewe lambs under the influence of two different feeding plans / Avaliação ultrassonográfica por Doppler da artéria mamária de cordeiras da raça Bergamácia Brasileira sob a influência de dois planos de alimentação diferentes

Blood supply of mammary gland is extremely important, since it is a crucial factor in the mammary tissue development. The objective of this study was to describe and assess main mammary artery hemodynamic characteristics of lambs with two growth rates, using Doppler ultrasound. Two experimental groups, A and B, (n=10) of female Brazilian Bergamasca lambs were kept under the same management conditions and facilities. There were two phases: Phase 1, from 90 days of age until onset of puberty; Phase 2, from puberty until 1 year of age. During phase 1, a specific diet was formulated to each experimental group to obtain two different average daily gains: 150g, for treatment A, and 250g, for treatment B. During phase 2, there was no difference on the diet offered to both groups. Every 14 days, all animals were weighed and their body condition score was evaluated. Every 60 days, ultrasound exams (Doppler) of mammary artery were performed to obtain resistance and pulsatility indexes. Treatment B lambs showed higher weight gain and higher body condition score (P<0.05). However, for resistance and pulsatility indexes, there was no difference between treatments (P>0.05). Hemodynamic values remained constant, independent of diet or body development presented by the animals. Obtained data is valuable information on Bergamasca ewe lambs development.(AU)

O suprimento sanguíneo da glândula mamária é extremamente importante, uma vez que é um fator crucial para o desenvolvimento do tecido mamário. Assim, a necessidade de registro dos parâmetros de fluxo sanguíneo arterial é evidente. O objetivo do estudo foi descrever e avaliar as principais características hemodinâmicas da artéria mamária de cordeiras submetidas a diferentes taxas de crescimento, usando o ultrassom Doppler. Dois grupos experimentais, A e B, (n=10) de cordeiras da raça Bergamácia brasileira foram mantidas sob as mesmas condições de manejo e instalações. O estudo foi dividido em diferentes fases, sendo: Fase 1, de 90 dias de idade até o início da puberdade; Fase 2, desde a puberdade até 1 ano de idade. Durante a fase 1, dietas específicas foram formuladas para cada grupo experimental, a fim de obter duas médias diferentes de ganho de peso diário: 150g, para o tratamento A, e 250g, para o tratamento B. Durante a Fase 2, não houve diferença na dieta oferecida para os dois grupos. A cada 14 dias, todos os animais foram pesados e determinado o escore de condição corporal. A cada 60 dias, exames de ultrassom (Doppler) da artéria mamária foram realizados a fim de calcular os índices de resistência e pulsatilidade. As cordeiras do tratamento B registrou maior ganho de peso e escore de condição corporal (P<0,05). No entanto, não houve diferença para os índices de resistência e pulsatilidade entre os tratamentos (P>0,05). Os valores hemodinâmicos permaneceram constantes, independente da dieta ou o desenvolvimento do corpo apresentada pelos animais. Assim, os dados obtidos são informações valiosas sobre o desenvolvimento da raça a que se refere.(AU)

Achados ultrassonográficos da glândula mamária de cabras naturalmente infectadas com o vírus da artrite encefalite caprina / Ultrasonographic findings of mammary glandof goats naturally infected with caprine arthritis encephalitis virus

A artrite encefalite caprina é uma virose que está distribuída mundialmente nos rebanhos. Na forma mamária, é predominante a mastite crônica, que pode causar assimetria e endurecimento do úbere, mais conhecida como mastite endurativa crônica, levando à redução na produção leiteira. A ultrassonografia é um bom método de avaliação da glândula mamária, pois consiste em uma técnica não invasiva, rápida e de fácil aplicação. Este estudo objetivou avaliar as características ultrassonográficas (escala de cinza, ecogenicidade e homogeneidade) do parênquima mamário de 20 cabras sororreagentes e 20 não sororreagentes para o vírus da artrite encefalite caprina. Observou-se que o diâmetro médio dos linfonodos retromamários de animais sororreagentes (0,72cm) para o vírus da artrite encefalite caprina foi menor (P=0,02) que o dos animais não sororreagentes (0,93cm). Na análise entre as porções do úbere, os valores da escala de cinza do terço distal da porção caudal do parênquima mamário foram maiores nos animais sororreagentes (P<0.0001, lado direito; P=0,02, lado esquerdo). Tais dados sugerem que o aumento na escala de cinza do parênquima mamário das cabras pode estar correlacionado com as alterações crônicas causadas pela artrite encefalite caprina, como a mastite endurativa. Em relação aos aspectos subjetivos de ecogenicidade e homogeneidade, os grupos não apresentaram diferença entre si (P>0,05), exibindo em sua maioria padrões hipoecoicos e heterogêneos. Diante dos resultados, o presente estudo aponta indícios de que a artrite encefalite caprina pode causar alterações na escala de cinza mensuráveis pela ultrassonografia, a qual pode ser utilizada como método auxiliar eficiente e não invasivo no monitoramento e diagnóstico precoce da mastite endurativa.(AU)

The caprine arthritis encephalitis is a virosis with worldwide distribution in livestock and in the mammary form chronic mastitis is prevalent, which can cause assimetric and hardening of the udder, known as indurative chronic mastitis leading to reduction in milk production. The ultrasound is a good method of assessing the mammary gland, because the technique is non-invasive, fast, and easy to apply. This study aimed to evaluate the ultrasonographic features (grayscale, echogenicity, and homogeneity) of mammary parenchyma of 20 seroreacting goats and 20 not seroreacting for caprine arthritis encephalitis virus. It was observed that the average diameter of retromammary lymph nodes of seroreacting animals (0.72cm) to caprine arthritis encephalitis virus was smaller (P= 0.02) than in non seroreacting animals (0.93cm). In analysis between the portions of the udder, the grayscale values of the distal third of the caudal portion of the mammary parenchyma was higher in seroreacting animals (P<0.0001, right side; P= 0.02, left side). Such data suggest that the increase in ultrasonographic grayscale of mammary parenchyma of goats can be correlated to chronic changes caused by caprine arthritis encephalitis, as indurative mastitis. In relation to the subjective aspects of echogenicity and homogeneity, the groups showed no difference between them (P>0.05), displaying mostly heterogeneous and hypoechoic standards. From the results, this study points to evidence that the caprine arthritis encephalitis can cause changes in grayscale measurable by ultrasound, and this can be used as an efficient and non-invasive helper method for monitoring and early detection of indurative mastitis.(AU)

Mastite bovina por Prototheca zopfii na região oeste do Paraná: Relato de casos / Bovine mastitis by Prototheca zopfii in western Paraná: Case reports / Mastitis bovina por Prototheca zopfii en la región oeste de Paraná: Relato de casos

Relatam-se três casos de mastite clínica em vacas da raça Jersey de uma propriedade localizada na região Oeste do estado do Paraná, refratários ao tratamento com antimicrobianos. Após realização de cultura das amostras de leite, foi identificada Prototheca zopfii, uma alga aclorofilada, unicelular, presente em matéria orgânica e resistente a antimicrobianos. Foi indicado o descarte dos animais positivos e, como medida de profilaxia, a higienização de caixas de abastecimento de água e bebedouros, uma vez que o manejo da ordenha e higienização da ordenhadeira era realizada de maneira adequada na propriedade. De acordo com a literatura consultada, este é o primeiro relato de mastite por Prototheca zopfii na região Oeste do Paraná, salientando a importância da realização da cultura de amostras de leite de vacas portadoras de mastite, especialmente em casos refratários ao tratamento.(AU)

Three cases of clinical mastitis were reported in Jersey cows at a farm located in western Parana, with a history of refractory treatment with antimicrobials. Milk sample cultures presented Prototheca zopfii, an aclorophylated, unicellular algae, present in organic matter and resistant to antimicrobial treatment. The disposal of positive animals was indicated, and the prophylactic measure of cleaning the water storage and drinking containers were encouraged, since the milking and cleaning of the milking machine were properly performed at the farm. According to the literature, this is the first report of mastitis by Prototheca zopfii in western Parana, thus emphasizing the importance of performing cultures to the milk samples of cows presenting mastitis, especially in cases that are refractory to treatment.(AU)

Tres casos de mastitis clínica se ha relatado en vacas de la raza Jersey, de una propiedad ubicada en la región Oeste del Estado de Paraná, resistentes al tratamiento con antimicrobianos. Después de la realización de cultura de las muestras de leche, se identificó Prototheca zopfii, un alga aclorofilada, unicelular, presente en materia orgánica y resistente a antimicrobianos. Se aconsejó el descarte de los animales positivos y, como medida de profilaxis, la higienización de las cajas de abastecimiento de agua y bebederos, una vez que el manejo de ordeña e higienización de la ordeñadera era realizada de forma adecuada en la propiedad. De acuerdo con la literatura consultada, este es el primer relato de mastitis por Prototheca zopfii en la región Oeste de Paraná, resaltando la importancia de realización de cultura de las muestras de leche de vacas portadoras de mastitis, especialmente en casos resistentes al tratamiento.(AU)

In vitro culture of ovine mammary gland cells expressing beta-lactoglobulin and beta-casein / Células da glândula mamária ovina cultivadas in vitro expressam beta-lactoglobulina e beta-caseina

The expression of milk proteins in vitro is essential to exploit the mammary gland cells as a biological model. Enzymatic tissue disaggregation has been widely used to establish mammary cell culture, but its effect in long-term ovine mammary cell culture is not completely elucidated. This study aimed at comparing mechanical/enzymatic and mechanical dissociation methods to establish ovine mammary cell culture. We compared cellular differentiation induced by lactating ewe serum or fetal bovine serum based on the gene expression levels of milk proteins (beta-lactoglobulin, alpha s1-casein, and betacasein). Mechanically dissociated cells were positive immunostaining for cytokeratin 8.13, such as mammary epithelial cells. These cells are responsible for milk protein expression and they are low immunostaining for vimentin, mesenchymal marker. Mechanical/enzymatic dissociation cells were positive for vimentin. The fastest cell growth (cell/hour) was observed in the mechanical dissociation group cultured with 10% fetal bovine serum medium. Mechanically and mechanically/enzymatically derived cells were able to express beta-casein and beta-lactoglobulin, but not alpha s1-casein. The relative expression of beta-lactoglobulin was not affected by the tissue dissociation method or culture media, beta-casein relative expression was down regulated in mechanically dissociated cells cultured in the presence of lactating ewe serum, (P = 0.019). Beta-casein relative expression was also down regulated in mechanically/enzymatically dissociated cells cultured with fetal bovine serum (P = 0.021). In the present conditions, we conclude that mechanical dissociation followed by culture with 10% of fetal bovine serum was the most efficient method to induce milk proteins' mRNA expression by ovine mammary epithelial cells in vitro.(AU)

A expressão in vitro de proteínas do leite é essencial para explorar as células da glândula mamária como um modelo biológico. A desagregação tecidual via enzimática é amplamente utilizada para o estabelecimento cultivo de células mamárias. No entanto, seu efeito a longo prazo no cultivo de células da glândula mamária ovina ainda não é bem elucidado. Este estudo tem como objetivo comparar dois métodos de dissociação tecidual, mecânico/enzimático e mecânico, para estabelecer cultivo celular de glândula mamária ovina. A indução da diferenciação celular, por adição de soro de ovelha lactante ou soro fetal bovino, foi avaliada pelos níveis de expressão de proteínas do leite (beta-lactoglobulina, alpha s1-caseína e beta-caseína). Células mecanicamente dissociadas foram positivamente marcadas para a presença de citoqueratina 8.13, marcador para células epiteliais mamárias. Essas células são as responsáveis pela produção das proteínas do leite e são pouco marcadas para a presença de vimentina, marcador para células de origem mesenquimal. Já as células obtidas da dissociação mecânica/ enzimática foram positivamente marcadas para presença de vimentina. A maior velocidade de crescimento (células/hora) foi observado para o grupo com dissociação mecânica cultivado em meio com 10% de soro fetal bovino. As células obtidas tanto da dissociação mecânica quanto mecânica/enzimática foram capazes de expressar beta-lactoglobulina e beta-caseína, mas não alfa s1-caseína. A expressão relativa de beta-lactoglobulina não foi afetada pelo método de dissociação ou meio de cultivo. A expressão relativa da beta-caseína foi negativamente regulada para células mecanicamente dissociadas e cultivadas na presença de soro de ovelha lactante (P = 0,019). A expressão relativa da beta-caseína também foi negativamente regulada para células dissociadas de forma mecânica/enzimática e cultivadas com soro fetal bovino (P = 0,021). Nas condições do presente estudo, concluímos que o método de dissociação mecânica seguido pelo cultivo em meio com 10% de soro fetal bovino foi o método mais eficiente para induzir a expressão mRNA de proteínas do leite por células epiteliais mamárias ovinas in vitro.(AU)